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¿QUÉ SON LAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS? Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos presentes. Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no. Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de múltiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio. ¿Cuáles son las Pruebas Bioquímicas? Existe una gran variedad de Pruebas Bioquímicas que son aplicadas a seres vivos (Microorganismos), aunque en este tipo de Bacterias (Gram Positivas) sólo se realizan 3 Pruebas básicas que son:  Prueba Catalasa.  Prueba Coagulasa.  Hemólisis.  CATALASA. ¿Qué es la Prueba Catalasa? Es una prueba en la cual, el objetivo principal es buscar la presencia de la enzima catalasa y diferenciar Staphylococcus de Streptococcus, bacterias que viven en ambientes aerobios requieren de catalasa para convertir el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno molecular. (+) Staphylococcus aureus. La prueba es positiva cuando se ponen en contacto una bacteria con actividad catalasa con Agua Oxigenada y se producen burbujas de oxígeno; es decir, efervescencia. O bien, la reacción que ocurre es la siguiente: H2O2 H2O+O2 ( - ) Streptococcus: Representa el resultado negativo de la Prueba Catalasa. Usos: Se emplea para diferenciar el género Staphylococcus (catalasa positivo) del género Streptococcus (catalasa negativo). ¿Qué es la Prueba Coagulasa? Es una prueba que se realiza después de la Prueba Catalasa, debido a que al obtener el resultado de la preuba antes mencionada, sabremos si es o no necesaria realizar la Prueba Coagulasa. ¿Qué es la Enzima Coagulasa? La Enzima Coagulasa es un enzima capaz de desnaturalizar la bibrina del plasma. El objetivo es buscar en factor de aglutinación de los microorganismos cuando estos se mezclan con el plasma. Esta prueba se utiliza para diferenciar microorganismos del genero Staphylococcus. La técnica en tubo detecta coagulasa libre y ligada. Mecanismo de acción de la coagulasa libre: Procoagulasa (enzima extracelular bacteriana) reacciona con un factor activador presente en el plasma sanguíneo similar a la protrombina, dando lugar a un complejo análogo a la trombina (coagulasa propiamente dicha) que reacciona con fibrinógeno formando un coágulo de fibrina en ausencia de Ca2+. La coagulasa ligada o factor de agregación; actúa directamente sobre el fibrinógeno y lo convierte en fibrina. (No requiere la presencia de activadores plasmáticos). Resultados: Estratificaremos los resultados en 4 distintos niveles: 1.- Pequeños coágulos no oganizados. 2.- Pequeños coágulos oganizados. 3.- Gran coágulo organizado. 4.- Todo el contenido aparece coagulado y se mantiene cuando invierte el tubo.  HEMÓLISIS. ¿Qué es la Hemólisis? Es el rompimiento de la sangre por la enzima llamada hemolisina que es una proteína la cual destruye la hemoglobina contenida los eritrocitos, con la cual la bacteria se alimenta de esta proteína transportadora (Hemoglobina). Prácticamente cualquier tipo de "medio base" puede ser utilizado para preparar agar sangre, si el fin es el aislamiento general de microorganismos. En cambio para identificar el tipo de hemolisis producida, necesariamente debe emplearse como base un medio carente de azucares, pues el descanso del pH provocado por su fermentación puede inactivar las hemolisinas bacterianas. Además el ácido por sí mismo puede causar hemolisis. ¿Cómo se Interpreta? GAMA HEMOLISIS (γ): No hay actividad hemolítica ni decoloración alguna del medio, es decir, no se observa ningún cambio. ALFA HEMOLISIS (α). Se observa una zona de destrucción parcial de eritrocitos alrededor de la colonia, con frecuencia va acompañada de coloración verdosa, pardosa o café alrededor de la colonia sembrada. BETA HEMOLISIS (β). Se puede ver una zona de destrucción total de eritrocitos alrededor de la colonia, de apariencia clara e incolora, o bien color transparente alrededor de la colonia. Se consideran positivos los niveles 3 y 4.